在三分损益法中，“三分”指的是将一段弦长分为三等分，“损”和“益”则是指增加或减少这段弦长的比例。具体来说，如果从一个基频开始，将其弦长减去三分之一（即“三分损一”），就得到了比原音高五度的新音；而如果将其弦长增加三分之一（即“三分益一”），则得到比原音低四度的新音。
通过反复应用这一规则，可以依次得出一系列音阶上的音高。按照这种方法，经过六次“三分损一”操作后，可以回到起始点的一个八度之上，从而形成了一个完整的音阶体系。而这个过程恰好包含了十二个不同的音级，也就是我们今天所熟知的十二律。
三分损益法虽然简单易行，但它却能够较为准确地模拟自然界的和谐音程，并且为后来西方音乐理论的发展提供了重要的参考依据。尽管如此，由于其基于纯律而非平均律的特性，在实际应用过程中可能会出现一些微小偏差，但这并不妨碍它成为古代中国音乐文化的重要组成部分之一。
